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HACAT人永生化角質形成細胞
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HACAT 人永生化角質形成細胞
HACAT 人永生化角質形成細胞是皮膚生物學與皮膚病研究領域的重要細胞模型,為探索皮膚生理病理機制、開發(fā)治療策略提供了關鍵實驗基礎。
HACAT 細胞源于人正常包皮組織,通過轉染 E6/E7 基因實現(xiàn)永生化。在體外培養(yǎng)時,細胞呈貼壁生長,形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形,類似正常角質形成細胞的鋪路石樣外觀,細胞間連接緊密,可形成多層細胞結構,模擬皮膚角質層的部分特性。與原代角質形成細胞相比,HACAT 細胞具有無限增殖能力,克服了原代細胞傳代次數(shù)有限的局限,能夠穩(wěn)定提供大量細胞用于實驗研究。同時,它保留了角質形成細胞的部分生物學功能,可表達角蛋白 10(K10)、角蛋白 14(K14)等多種角質形成細胞特異性蛋白,這些蛋白參與維持細胞結構與皮膚屏障功能。
培養(yǎng) HACAT 細胞需要特定的條件和方法。常用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,為細胞生長提供豐富的營養(yǎng)物質和生長因子;同時添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液,防止微生物污染。細胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中生長,二氧化碳可調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH 值,維持細胞適宜的生存環(huán)境。在培養(yǎng)過程中,需定期觀察細胞生長狀態(tài),當細胞融合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液進行消化傳代。傳代時要嚴格控制消化時間,避免過度消化損傷細胞。此外,為保證細胞活性和生物學特性穩(wěn)定,需定期復蘇凍存的早期代數(shù)細胞,防止細胞在長期培養(yǎng)過程中出現(xiàn)老化或性狀改變。
在科研應用方面,HACAT 細胞具有廣泛的用途。在皮膚疾病研究中,科研人員通過對該細胞進行基因操作、藥物處理等實驗,能夠深入探究銀屑病、皮膚癌等疾病的發(fā)病機制,分析疾病發(fā)**展過程中細胞形態(tài)、功能和基因表達的變化。在皮膚藥理學研究領域,HACAT 細胞可用于評估藥物對皮膚細胞的毒性和治療效果,篩選潛在的治療皮膚疾病的藥物,為臨床治療方案的制定和新藥物的開發(fā)提供實驗依據(jù)。此外,該細胞還可用于研究皮膚細胞與皮膚微環(huán)境之間的相互作用,助力開發(fā)更有效的皮膚疾病綜合治療策略。
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