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4G11小鼠雜交瘤細(xì)胞
貨號(hào):BY-1142
品牌:其它品牌
規(guī)格:T25瓶
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4G11 小鼠雜交瘤細(xì)胞
4G11 小鼠雜交瘤細(xì)胞是通過將小鼠 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后篩選獲得的細(xì)胞系,兼具 B 淋巴細(xì)胞特異性識(shí)別并分泌抗體的能力,以及骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特性,是單克隆抗體制備與免疫學(xué)研究的重要工具。
在細(xì)胞特性上,4G11 細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng),在顯微鏡下觀察,細(xì)胞多為規(guī)則的圓形,直徑約 10 - 15μm,折光性良好,細(xì)胞間界限清晰。其細(xì)胞核大而圓,占據(jù)細(xì)胞約三分之二的空間,核仁明顯,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)偶見微小囊泡,這些結(jié)構(gòu)與抗體的合成、儲(chǔ)存和分泌密切相關(guān)。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè),可確認(rèn) 4G11 細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá) CD19、CD79a 等 B 淋巴細(xì)胞標(biāo)志性分子,明確其細(xì)胞來源屬性。同時(shí),該細(xì)胞的染色體核型相對(duì)穩(wěn)定,能夠保證在體外長(zhǎng)期傳代過程中維持增殖能力。
4G11 細(xì)胞的培養(yǎng)需要特定的環(huán)境與條件。通常使用添加 10% - 15% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基為其提供營(yíng)養(yǎng),同時(shí)加入 1% 的雙抗(青霉素和鏈霉素)預(yù)防細(xì)菌污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),以保證細(xì)胞活性。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到
時(shí),需及時(shí)進(jìn)行傳代。傳代時(shí)采用離心重懸法,去除舊培養(yǎng)基后,按 1:3 - 1:5 的比例將細(xì)胞接種至新的培養(yǎng)瓶中。凍存時(shí),使用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮,確保細(xì)胞復(fù)蘇后仍具有良好活性。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,4G11 小鼠雜交瘤細(xì)胞主要用于單克隆抗體制備。科研人員通過免疫小鼠,獲取能識(shí)別特定抗原的 B 淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合篩選出 4G11 細(xì)胞后,經(jīng)克隆化培養(yǎng),可產(chǎn)生針對(duì)單一抗原表位的高特異性單克隆抗體。這些抗體在疾病診斷方面,可用于開發(fā)腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑、病原體快速診斷試劑盒;在基礎(chǔ)研究中,有助于深入探究抗原 - 抗體結(jié)合機(jī)制、解析細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路;在治療研究領(lǐng)域,可作為靶向藥物的前體,通過與化療藥物、放射性核素偶聯(lián),實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的精準(zhǔn)打擊。
4G11 細(xì)胞系具備顯著優(yōu)勢(shì),其抗體分泌穩(wěn)定,可重復(fù)性強(qiáng),適合大規(guī)模的抗體生產(chǎn);細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)成熟,操作流程簡(jiǎn)便,易于在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下開展研究。然而,它也存在局限性,細(xì)胞融合篩選過程復(fù)雜且耗時(shí),部分 4G11 細(xì)胞在長(zhǎng)期傳代后可能出現(xiàn)抗體分泌能力下降的情況;此外,由于其來源于小鼠,產(chǎn)生的單克隆抗體應(yīng)用于人體時(shí)存在免疫原性,需進(jìn)行人源化改造以降低免疫排斥風(fēng)險(xiǎn)。
使用 4G11 小鼠雜交瘤細(xì)胞時(shí),需定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞的抗體分泌活性,及時(shí)篩選出高分泌且穩(wěn)定的細(xì)胞株;嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,防止細(xì)胞污染;合理控制傳代次數(shù),避免過度傳代導(dǎo)致細(xì)胞老化,從而保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。憑借獨(dú)特的生物學(xué)特性,4G11 細(xì)胞將持續(xù)推動(dòng)生物醫(yī)藥領(lǐng)域的研究與發(fā)展。
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