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IF4G7-NOGO小鼠雜交瘤細胞
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IF4G7-NOGO 小鼠雜交瘤細胞
IF4G7-NOGO 小鼠雜交瘤細胞是通過將經(jīng)特定抗原免疫的小鼠 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,并經(jīng)嚴格篩選獲得的特殊細胞系。該細胞系整合了 B 淋巴細胞特異性分泌抗體的功能和骨髓瘤細胞無限增殖的能力,在單克隆抗體制備、神經(jīng)生物學研究及相關疾病診療探索中發(fā)揮著重要作用。
從細胞特性來看,IF4G7-NOGO 細胞呈懸浮生長,在顯微鏡下觀察,細胞多為圓形或橢圓形,直徑約 10 - 15μm,折光性良好,細胞邊緣清晰。細胞核大而圓,核仁明顯,占據(jù)細胞約三分之二的空間,細胞質內可見與抗體合成、運輸相關的囊泡結構。利用流式細胞術檢測,可穩(wěn)定表達 CD19、CD79a 等 B 淋巴細胞特異性標志物,明確其 B 細胞來源;同時,其染色體核型穩(wěn)定,確保在體外長期傳代過程中,能夠持續(xù)穩(wěn)定地增殖并分泌針對特定抗原(如 NOGO 蛋白)的抗體。
培養(yǎng) IF4G7-NOGO 細胞時,常用添加 10% - 15% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,同時加入 1% 的雙抗(青霉素和鏈霉素)防止細菌污染。細胞適宜生長在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,當細胞密度達到
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時,需及時進行傳代。傳代采用離心重懸法,按 1:3 - 1:5 的比例將細胞接種至新的培養(yǎng)瓶。凍存時,使用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮,以維持細胞活性。
在科研應用領域,IF4G7-NOGO 小鼠雜交瘤細胞的核心價值在于制備針對 NOGO 蛋白的單克隆抗體。NOGO 蛋白在神經(jīng)再生抑制中扮演關鍵角色,該細胞產生的抗體可用于開發(fā)檢測 NOGO 蛋白表達水平的診斷試劑,助力神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷與病情監(jiān)測;在基礎研究中,有助于深入探究 NOGO 蛋白在神經(jīng)損傷修復、神經(jīng)元生長抑制等過程中的作用機制;在治療方面,可作為靶向藥物的基礎,通過阻斷 NOGO 蛋白的功能,促進神經(jīng)再生,為脊髓損傷、多發(fā)性硬化癥等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療提供新方向。
IF4G7-NOGO 細胞系優(yōu)勢顯著,其抗體分泌穩(wěn)定且特異性高,實驗重復性好,便于開展大規(guī)模研究;體外培養(yǎng)技術成熟,操作相對簡便。但它也存在局限性,細胞融合篩選過程復雜耗時,部分細胞在傳代過程中可能出現(xiàn)抗體分泌能力下降的情況;且小鼠來源的單克隆抗體應用于人體時存在免疫原性,通常需要進行人源化改造以降低免疫排斥反應。
使用 IF4G7-NOGO 小鼠雜交瘤細胞時,需定期檢測細胞的抗體分泌活性和特異性,及時篩選穩(wěn)定分泌的細胞株;嚴格遵循無菌操作規(guī)范,防止細胞污染;合理控制傳代次數(shù),避免細胞老化影響實驗結果。憑借其獨特的生物學特性,IF4G7-NOGO 細胞將持續(xù)推動神經(jīng)生物學研究及相關疾病治療領域的發(fā)展。
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